哪些辦法可以驗(yàn)證高壓滅菌鍋的滅菌效果

　　高壓蒸汽滅菌是利用高壓和高熱釋放的潛熱進(jìn)行滅菌。原理是在密閉的容器中，水的沸點(diǎn)因?yàn)檎羝麎毫υ龃蠖?，以此提高蒸汽的溫度，用?lái)進(jìn)行有效滅菌。

　　對(duì)于滅菌器的效果驗(yàn)證，目前并沒有相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格的要求驗(yàn)證的頻次，但是實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)自行制定驗(yàn)證頻次規(guī)定，并嚴(yán)格按照要求進(jìn)行。

　　一、化學(xué)指示劑法

　　原理：

　　化學(xué)指示劑在一定溫度與作用時(shí)間下，會(huì)受熱變色或變形，根據(jù)這一特點(diǎn)來(lái)判斷是否達(dá)到需要的滅菌參數(shù)。

　　一般實(shí)驗(yàn)室常用的是3M壓力滅菌指示膠帶，這種指示膠帶是利用滅菌前后膠帶顏色變化來(lái)判斷滅菌效果。

　　它是由熱敏化學(xué)物質(zhì)與顯色劑及漆輔料制成油墨，并將油墨以條紋狀印制在特制的一面膠紙帶制成。指示膠帶可以直接粘貼于包裹外，長(zhǎng)度不低于5cm，并輕壓膠帶以增加粘性和封包效果；在121℃持續(xù)20min或130℃持續(xù)4min后，膠帶上印有的斜行的白色指示線條會(huì)變黑，成為黑色線條；如變色不均勻，可認(rèn)為該包裹不符合滅菌條件。

　　二、留點(diǎn)溫度計(jì)法

　　原理：

　　留點(diǎn)溫度計(jì)法是利用水銀溫度計(jì)不回流的特性，其原理跟傳統(tǒng)體溫計(jì)相似，可以指示滅菌器在滅菌過(guò)程中達(dá)到的最高溫度。

　　驗(yàn)證時(shí)把水銀溫度計(jì)放在盛水的大三角瓶里，滅菌時(shí)把三角瓶放在滅菌器的上部和下部，滅菌結(jié)束后看水銀溫度計(jì)的溫度和要求溫度是否一致。此法只能驗(yàn)證溫度，不能指示滅菌時(shí)間是否達(dá)到要求，因此是滅菌器驗(yàn)證的至低標(biāo)準(zhǔn)。

　　三、自制測(cè)溫管法

　　原理：

　　利用一些化學(xué)藥品受熱熔化后再冷卻，晶體的外形不同的特性，把化學(xué)藥品密封在小玻璃管內(nèi)，滅菌時(shí)放在滅菌器里，滅菌完后觀察晶體的形狀，就可以判斷溫度是否達(dá)標(biāo)。

　　四、生物指示劑法

　　原理：

　　利用非致病性的嗜熱脂肪桿菌的芽孢作為指示菌，來(lái)測(cè)定熱力滅菌的效果。嗜熱脂肪桿菌的芽孢對(duì)熱的抗性較強(qiáng)，其耐熱能力與病原微生物肉毒梭菌芽孢相似，以此為指示菌，驗(yàn)證滅菌器能否達(dá)到滅菌要求。

　　生物指示劑分為三種：芽孢懸液、芽胞菌片、菌片和培養(yǎng)基混合指示管。一般放在滅菌容器的5個(gè)點(diǎn)：下層的前、中、后和上層、中層的中央點(diǎn)。滅菌后取指示劑接種到溴甲酚紫-葡萄糖蛋白胨水中，55-60℃培養(yǎng)2-7天，若培養(yǎng)基澄清、顏色沒有變化即說(shuō)明芽孢被殺死，滅菌器滅菌效果良好；如果培養(yǎng)基黃色渾濁，說(shuō)明芽孢未被殺滅，滅菌器滅菌效果不合格。芽孢懸液和芽孢菌片的驗(yàn)證方法均是如此。

　　目前實(shí)驗(yàn)室還常用商品化的生物指示管，其原理與芽孢懸液和芽胞菌片相同，指示管中有嗜熱脂肪芽孢桿菌芽孢和培養(yǎng)液玻璃小管，將指示管放在滅菌容器內(nèi)的各個(gè)點(diǎn)上，高壓滅菌后，將管中盛培養(yǎng)液的玻璃管擠碎，培養(yǎng)液從內(nèi)部的小管中被放出，放入56℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，同時(shí)做陽(yáng)性對(duì)照。若是滅菌器滅菌效果不合格，指示管內(nèi)的芽孢復(fù)活后生長(zhǎng)會(huì)改變?nèi)鉁念伾侨鉁優(yōu)辄S色；若是滅菌器滅菌效果良好則管內(nèi)芽孢被滅活不再生長(zhǎng)，肉湯仍舊是原來(lái)的紫色。

　　常用的試劑是苯甲酸，苯甲酸的熔點(diǎn)為121-123℃，跟我們要求的滅菌器的滅菌溫度基本吻合，因此滅菌時(shí)把固體苯甲酸密封在小玻璃管內(nèi)放進(jìn)滅菌器，滅菌結(jié)束就可以觀察苯甲酸的狀態(tài)來(lái)驗(yàn)證滅菌器是否達(dá)到了要求溫度。這種方法的局限跟留點(diǎn)溫度計(jì)法相同，也只能指示滅菌時(shí)的溫度，對(duì)滅菌時(shí)間是否達(dá)到要求無(wú)法判斷。